为更好地反映热炎宁合剂内在质量,完善质量标 准,本研究中建立了其高效液相色谱(HPLC)指纹图谱 分析方法,并对其主要药效成分绿原酸、秦皮乙素、咖 啡酸、虎杖苷、野黄芩苷、木犀草素、芹菜素和大黄素含 量进行测定,为高效控制和评价热炎宁合剂的质量提 供依据。仪器:e2695 Alliance型高效液相色谱仪,包含DAD 紫外检测器(美国 Waters 公司);Mettler XP6 型电子分 析天平(瑞士Mettler Toledo公司);BSA124S型电子分析 天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司);KQ - 250E型 数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
采用 DAD 检测器全波长扫描样品溶液, 结果绿原酸、秦皮乙素、咖啡酸、虎杖苷、野黄芩苷、木 犀草素、芹菜素的最大吸收波长分别为 325,323,232, 306,335,349,338 nm,大黄素最大吸收波长为 254 nm, 以指纹图谱基线平稳、色谱峰较多,各色谱峰间分离效 果好为指标,使用仪器固定波长变换程序功能经多次 试验确定采用325,254 nm分段波长法作为样品指纹图 谱和8个有效成分含量测定的采集波长。分别考察了不同比例甲醇水溶液和乙醇 水溶液作为提取溶剂,超声和加热回流两种提取方 法,以及不同提取时间(30,45,60 min)对 8 个指标成 分和指纹图谱的影响。结果发现,70% 甲醇溶液超声处 理 30 min为最佳提取方法。